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2019-12-08GFP绿色荧光蛋白的性能和GFP用于分子标记

利用绿色荧光蛋白独特的发光机制，可将GFP作为蛋白质标签（protein tagging），即利用DNA重组技术，将目的基因与GFP基因构成融合基因，转染合适的细胞进行表达，然后借助荧光显微镜便可对标记的蛋白质进行细胞内活体观察。由于GFP相对较小，只有238个氨基酸，将其与其他...

2019-12-08GFP在植物学研究中的应用

天然gfp的荧光强度低，表达易受温度影响，通过改变发色团氨基酸种类和排列顺序，获得了改良型的gfp。将第65位的ser突变成thr，可显著增加荧光强度和稳定性；第66位氨基酸tyr突变为his或trp，荧光波长变短，可分别得到发蓝光和蓝绿光的gfp；改变发色团周边氨基酸的种类，也...

2019-12-08重组蛋白表达技术和重组蛋白表达载体

重组蛋白表达技术和重组蛋白表达载体现已广泛应用于生物学各个具体领域,尤其是体内功能研究和蛋白质的大规模生产。蛋白表达载体按照表达宿主的不同分为3类:B类，M类和Lv类。B类的表达宿主为大肠杆菌，M类的宿主为哺乳动物细胞，Lv类是慢病毒载体，宿主可以为哺乳动物细胞或原代细胞。

2019-12-07病毒介导的基因转移

。病毒介导的转染又称为转导，它为难以转染的细胞类型提供了一种方法，可用于蛋白质过表达或抑制，是临床研究中最常用的方法(Glover et al , 2005; Pfeifer and Verma, 2001)。病毒转导的主要优点之一在于，该过程可以在活体内(体内)或培养细胞中(体...

2019-12-07转染类型和转染选择策略

转染通常是指将核酸输送到真核细胞，或者更明确地说是输送到动物细胞内。术语转染一般用来表示原核生物感染病毒或噬菌体中病毒核酸的摄取，导致成熟病毒颗粒的感染和生成。但该术语现在的含义包括将外源性核酸人工导入细胞内。

2019-12-04荧光显微镜为何要选择不同滤色片？

带通滤光片通常通过中间波长和区间宽度确定。在较为简单的荧光显微镜装置中，一旦激发光线离开激发滤光片，即会照射到靶标上，靶标上的荧光基团随即变为激发状态，然后发射向光谱的红外端迁移的光线。