2019-11-17过表达载体的构建方法及步骤
过表达载体主要是将目的基因的编码区(CDS)构建到相应的质粒或者病毒载体中,达到在目的基因过量表达的作用。常规过表达载体主要元件:Promoter—gene—linker—Fluorescent gene—抗药筛选gene。基因过表达载体又可以分为广泛启动子基因表达载体,组织特异...
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过表达载体主要是将目的基因的编码区(CDS)构建到相应的质粒或者病毒载体中,达到在目的基因过量表达的作用。常规过表达载体主要元件:Promoter—gene—linker—Fluorescent gene—抗药筛选gene。基因过表达载体又可以分为广泛启动子基因表达载体,组织特异...
了解详情2019-11-16提取质粒DNA和基因组DNA的区别
在分子生物实验室中,大家常用各种试剂盒做质粒DNA提取,如果都遵循操作,所得样本基本上是质粒DNA(plasmid),只有少量的基因组DNA(genomic DNA)会混入进来。基因组DNA和质粒DNA同为DNA分子,为什么基因组DNA没有被纯化出来呢?难道硅胶柱都自己有意识不成...
了解详情2019-11-16质粒的纯化和问题解答
质粒是能够自主复制的小型环状DNA分子,多存在于细菌及酵母菌等生物中,是基因工程中最常用的运载体,担负着将目的基因转移到宿主细胞中的重要使命。基因表达载体的构建(也就是目的基因与运载体结合)是基因工程的核心步骤,用作运载体的质粒更是掌上明珠。大家需要从细菌中分离出质粒以备后用。
了解详情2019-11-15GFP荧光蛋白标记的质粒载体激发光和发射光
绿色荧光蛋白(GFP)是一种通用的生物标记,可用于监测生理过程,可视化蛋白质定位并检测体内转基因表达 。GFP可以被488 nm激光线激发,并在510 nm处被更佳检测到。Green Fluorescent Protein (GFP) is a versatile biologi...
了解详情2019-11-14蓝光手电筒对小鼠体内萤光肿瘤的简易成像
用LUYOR-3260RB蓝光手电筒对GFP 转基因鼠进行基因表现型的分类。这些小鼠的大多数组织表达高水平的绿色萤光蛋白。同事用LUYOR-3260RB蓝光手电筒去激发活体动物上的绿色萤光蛋白并通过适当的LUV-30A观察眼镜来观察识别GFP 阳性的转基因幼鼠。
了解详情2019-11-13质粒载体构建以及需要注意的事项
载体构建(vectorconstruction):载体构建是分子生物学研究常用的手段之一。主要包括已有载体多克隆位点(MCS)的改造和已有载体启动子、增强子、筛选标记等功能元件的改造。是为把DNA分子运送到受体细胞中去,必须寻找一种能进入细胞、在装载了外来的DNA片段后仍能照样复...
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